Mark Ruffalo est né le 22 novembre 1967 dans le Wisconsin, aux Etats-Unis. Durant son adolescence, il s'installe avec sa famille à Los Angeles. Issu du conservatoire Stella Adler, il se consacre dans un premier temps au théâtre, en créant sa propre compagnie, la "Orpheus Theater Company". Dans cette compagnie, il est à la fois acteur, metteur en scène, producteur, créateur de décors. Il y apprend le métier de comédien mais, malgré de bonnes critiques, il n'arrive pas à percer dans les milieux du cinéma et de la télévision. Après dix ans d'efforts, il est près à tout abandonner, lorsqu'il fait la rencontre du scénariste Kenneth Lonergan, auteur de la pièce THIS IS OUR YOUTH dans laquelle Mark tient le premier rôle. C'est le début d'une collaboration qui les mènera en 2000 au film
Tu peux compter sur moi, pour lequel Mark Ruffalo est couronné du Prix d'interprétation masculine au Festival du Film de Montréal. Malgré ce succès éclatant - on le compare même à Marlon Brando - il ne s'éloigne jamais trop des planches de théâtre, même s'il accepte aussi des rôles dans des films hollywoodiens à gros budget. Mark Ruffalo a aussi écrit le scénario de The Destiny of Marty Fine de Michael Hacker. En 2005, il est producteur exécutif (en plus de jouer) de
We Don't Live Here Anymore.